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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章實(shí)用干貨 | 酵母細(xì)胞如何有效計(jì)數(shù)?

實(shí)用干貨 | 酵母細(xì)胞如何有效計(jì)數(shù)?

更新時(shí)間:2023-10-26點(diǎn)擊次數(shù):1517

酵母細(xì)胞,也稱酵母菌,在完成酵母細(xì)胞的制備后,科研人員需對(duì)酵母細(xì)胞的數(shù)量、死活、大小等進(jìn)行測(cè)定,觀測(cè)酵母細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)。

目前酵母細(xì)胞可應(yīng)用于食品工業(yè)、醫(yī)藥研究等領(lǐng)域,其中畢赤酵母細(xì)胞表達(dá)體系是目前已知酵母體系中表現(xiàn)ZuiHao的蛋白表達(dá)體系之一,可被用于納米抗體等醫(yī)藥疫苗方面。

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亞甲基藍(lán)染色法+人工顯微鏡計(jì)數(shù)(傳統(tǒng)方法)

傳統(tǒng)對(duì)酵母細(xì)胞的計(jì)數(shù)是以《國(guó)標(biāo):GB/T20886-2007,食品加工用酵母》為計(jì)數(shù)規(guī)則,使用亞甲基藍(lán)染色的方法,通過高倍數(shù)的顯微鏡和血細(xì)胞計(jì)數(shù)板-對(duì)酵母細(xì)胞進(jìn)行人工觀測(cè)計(jì)數(shù)。

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但亞甲基藍(lán)染料存在部分酵母細(xì)胞無法正常染色、染色時(shí)間長(zhǎng),且人工計(jì)數(shù)存在操作過程繁瑣、計(jì)數(shù)不準(zhǔn)確、數(shù)據(jù)無法追溯等缺陷。



熒光酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)儀+AOPI熒光染料 (新方法)

熒光酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,利用AOPI雙色熒光染色的方法,更加準(zhǔn)確地得出酵母細(xì)胞的數(shù)量和活率,相比于人工顯微鏡計(jì)數(shù)操作更便捷、計(jì)數(shù)時(shí)間更短、數(shù)據(jù)可追溯等。

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前期準(zhǔn)備熒光酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)儀-細(xì)胞計(jì)數(shù)片-酵母細(xì)胞樣品-AOPI熒光染料-移液器


操作流程

1-用移液器,按11比例取酵母細(xì)胞樣品和AOPI熒光染料

2-用移液器反復(fù)吹打幾次,混勻后,取10uL細(xì)胞樣品,加樣至細(xì)胞計(jì)數(shù)片

3-上樣后,選擇相對(duì)應(yīng)的細(xì)胞樣品類型

4-點(diǎn)擊“開始計(jì)數(shù)"——“查看數(shù)據(jù)"即可(全程自動(dòng)化操作,可實(shí)時(shí)觀察細(xì)胞圖像)


儀器介紹

JSY-FL-052型熒光酵母細(xì)胞計(jì)數(shù)儀,高倍放大光學(xué)系統(tǒng),雙色熒光通道,對(duì)直徑≥1um的酵母細(xì)胞進(jìn)行精準(zhǔn)計(jì)數(shù)分析。

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儀器實(shí)拍細(xì)胞圖

1-釀酒酵母細(xì)胞(識(shí)別圖)





2-畢赤酵母細(xì)胞(識(shí)別圖)



詳情數(shù)據(jù)

計(jì)數(shù)結(jié)果包括總細(xì)胞濃度、活/死細(xì)胞濃度、活/死細(xì)胞比率、總細(xì)胞聚團(tuán)率/濃度、活細(xì)胞聚團(tuán)率/濃度、死細(xì)胞聚團(tuán)率/濃度、活/死細(xì)胞直徑等計(jì)數(shù)結(jié)果、原始圖片、識(shí)別圖片、報(bào)告單等


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